что значит обследование на иппп методом пцр
Сколько стоит сдать ПЦР-анализ
Я пять лет работал в государственной медицинской лаборатории.
По опыту знаю, что пациентам бывает непросто разобраться с тем, какие тесты им нужно сдавать, да и нужно ли вообще. В этой статье расскажу, что такое ПЦР-анализы и можно ли на них сэкономить.
Сходите к врачу
Наши статьи написаны с любовью к доказательной медицине. Мы ссылаемся на авторитетные источники и ходим за комментариями к докторам с хорошей репутацией. Но помните: ответственность за ваше здоровье лежит на вас и на лечащем враче. Мы не выписываем рецептов, мы даем рекомендации. Полагаться на нашу точку зрения или нет — решать вам.
Что такое ПЦР-тесты и зачем их сдавать
В отличие от криминалистов, врачей обычно интересуют две вещи:
Но генетические анализы нужны не так уж часто, поэтому в статье мы будем говорить про ПЦР-анализы на инфекции.
Как работает ПЦР-анализ. У большинства живых существ на нашей планете, за исключением некоторых вирусов с РНК-геномами, генетический материал представляет собой длинную двухцепочечную молекулу ДНК.
Цепочка ДНК состоит из «звеньев» — нуклеотидов. Это четыре небольшие молекулы, строение которых универсально для всех живых существ. Из одного и того же набора нуклеотидов можно собрать геном вируса оспы, человека или синего кита. Вся разница — в порядке, в котором нуклеотиды идут в цепочке ДНК. Зная уникальный порядок нуклеотидов для участка ДНК какой-нибудь болезнетворной бактерии, мы можем засечь его присутствие в биологическом материале. А поскольку этот порядок уникален, мы не перепутаем его с человеческой ДНК.
Во время полимеразной цепной реакции кусочек чужеродного генетического материала из образца при помощи особого белка-фермента размножают много-много раз. В результате получается столько ДНК, что ее хватает для успешной идентификации.
Для каждого микроорганизма набор реактивов нужен свой. Поэтому врачи назначают не ПЦР-анализ вообще, а исследование на конкретный микроорганизм. Так что ПЦР-тест на гепатит С не поможет найти в образце еще и хламидии.
ПЦР-анализы бывают качественные и количественные. Качественные позволяют понять, есть ли в образце генетический материал бактерии или вируса, который мы ищем. А количественные — сколько именно там этого материала. Если сделать несколько таких тестов во время лечения, станет ясно, действует ли на микробов назначенное лекарство.
Как подготовиться к ПЦР-анализу
Чтобы выяснить, какая инфекция поразила человека, у него обычно берут кровь, мочу, образцы клеток слизистой из ротоглотки или с шейки матки.
В России кровь по умолчанию рекомендуется сдавать натощак, не менее чем с интервалом в 8—12 часов после приема пищи. Однако за рубежом таких строгих правил нет: считается, что перед походом в лабораторию можно позавтракать без сладкого и жирного, например кашей без сахара и масла, куриной грудкой или яйцом. Так что если у вас был легкий завтрак, кровь сдавать можно. Пить тоже не запрещено, но лучше ограничиться чистой водой без газа.
Если в качестве материала выступает моча, ее нужно собирать утром, как только проснетесь, в чистый контейнер для анализов или в вымытую с мылом банку из-под детского питания.
Правила, по которым нужно сдавать мазок на ПЦР из половых органов, отличаются для мужчин и для женщин. Всем за 1—2 дня до исследования нужно отказаться от секса, а в течение 1,5—2 часов перед исследованием — воздерживаться от мочеиспускания. Женщинам за сутки до процедуры не следует проводить спринцевание, пользоваться свечами и антисептиками для подмывания. Во время менструации сдавать биологический материал нельзя.
Можно ли верить ПЦР-тесту
Ни один лабораторный тест не обеспечивает абсолютной точности, всегда есть вероятность ошибки. Причем ошибиться тест может в обе стороны: либо не найти искомую инфекцию у пациента, которой он на самом деле заражен, либо обнаружить ее у человека, болеющего чем-то другим или вовсе здорового.
При этом ПЦР-анализы зачастую точнее других методов поиска возбудителя инфекционных заболеваний. Например, возбудителей гонореи у женщин можно искать под микроскопом, можно выращивать в чашке Петри, а можно определять методом ПЦР. В первом случае чувствительность анализа в пределах 36,2%, во втором — 89,7%, а в третьем — 89,9—100%. Получается, что ПЦР-анализ — самый надежный, и доверять ему можно. Примерно так же дела обстоят и с другими половыми инфекциями.
Информативность ПЦР в диагностике инфекций, передаваемых половым путемPDF, 152 КБ
Однако есть и относительно новые, менее надежные варианты ПЦР-тестов — например, на коронавирусную инфекцию. По словам Дениса Проценко, главного врача инфекционной больницы в Коммунарке, чувствительность тестов для выявления COVID-19 — 70—80%. Согласно китайским данным, чувствительность теста может быть еще ниже — в пределах 66—80%.
Но здесь многое зависит от времени взятия образца. Если мазок из горла взяли через 3—4 дня после появления симптомов, то вирус уже мог успеть спуститься из ротоглотки в легкие, и тогда вероятность найти его в мазке составляет всего 40%.
Хотя ПЦР-тесты на коронавирус работают хуже, чем ПЦР-тесты на половые инфекции, ничего точнее для диагностики коронавирусной болезни у нас пока нет. Врачи назначают повторный тест, если у них по результатам диагностики остаются сомнения.
Что значит обследование на иппп методом пцр
Интервью с к.б.н., руководителем группы ПЦР инфекционных заболеваний компании «Вега» ГК Алкор Био Виталием Ведерниковым.
К наиболее популярным в лабораторной практике методам тестирования ИППП в настоящее время относятся: культуральный метод, микроскопия в проходящем свете, иммунофлуоресцентный и иммуноферментный анализы, молекулярно-генетические методы, нацеленные на выявление ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты) патогенна.
Об особенностях лабораторной диагностики ИППП мы беседуем с к.б.н., руководителем группы ПЦР инфекционных заболеваний компании «Вега» ГК Алкор Био Виталием Ведерниковым.
— Какие из ИППП наиболее распространены и представляют наибольшую опасность для здоровья человека?
— Какие подходы к диагностике ИППП сегодня являются основными? 
— Существуют три основных подхода к диагностике ИППП. Это культуральный метод, бактериоскопия мазка с иммунофлуоресцентным мечением или без и тестирование с использованием методов амплификации нуклеиновых кислот, в том числе ПЦР в режиме реального времени. А вообще методов диагностики ИППП множество, но ни один из них не является идеальным. К примеру, ранее «золотым стандартом» считался культуральный метод (выращивание патогена на культуре, посев), но, как показала практика, и его следует использовать не в отдельности, а в сочетании с другими методами диагностики. К тому же метод, признанный «золотым стандартом» для диагностики одной инфекции, может совершенно не подходить для диагностики другой инфекции.
— Расскажите подробнее о современных подходах к комплексной диагностике ИППП
— Рассмотрим в данном ключе три безусловных патогена: гонорею, трихомонаду и хламидию.
Начнем с гонореи. Рекомендуемый алгоритм обследования на гонорею в России и за рубежом практически не отличается. Общепризнанно, что оптимальным является проведение бактериоскопии (то есть после окрашивания препарат исследуют под микроскопом) с окраской по Граму в сочетании с культуральным методом. Такая комбинация методов обеспечивает высокие показатели чувствительности и специфичности. Специфичность бактериоскопического исследования достигает 96-99%, это связано с тем, что данная бактерия имеет четкую морфологическую форму (в виде кофейного зерна), поэтому под микроскопом ее можно довольно точно определить.
Наиболее оправданным на сегодня показанием для применения ПЦР в целях диагностики гонореи следует считать наличие клинико-анамнестических данных в пользу бессимптомного протекания инфекции.
Иммунологические анализы для диагностики гонореи практически не используются и, вероятнее всего, не будут активно внедряться.
Ложноотрицательные результаты микроскопического исследования на влагалищные трихомонады неизбежны при безупречном проведении анализа, поскольку чувствительность этого метода даже в вагинальных препаратах составляет 40-80%, а в цервикальных мазках это простейшее обнаруживается у 60% пациенток с трихомониазом.
Проблема ложноположительных результатов наиболее часто применяемого в России микроскопического исследования на трихомонады с использованием окрашенных препаратов не менее актуальна, поскольку существуют объективные причины для гипердиагностики данного представителя простейших. Влагалищные трихомонады могут быть весьма вариабельны по размеру и форме, что нередко побуждает исследователя искать так называемые «атипичные формы», за которые могут быть приняты клеточные элементы, которые в процессе приготовления мазка в ряде случаев приобретают необычные морфологические характеристики. Таким образом, для повышения эффективности микроскопической диагностики следует учитывать трихомонады с характерной морфологией и/или характерной подвижностью. Любая же атипия является не дополнительным резервом эффективной диагностики, а реальным источником диагностических ошибок.
Исследование гуморального ответа при трихомониазе, как и при гонорее, в диагностических целях не регламентировано.
— Какова в целом роль ПЦР в диагностике ИППП?
Для диагностики микоплазмы гениталиум и вируса паппиломы человека ПЦР анализ считается единственным адекватным методом, так как другими методами эта инфекция выявляется крайне плохо. Это связано с тем, что морфологически микоплазму практически невозможно отличить от других бактерий, на культурах она растет очень плохо.
ПЦР метод позволяет диагностировать латентную стадию инфекции, малосимптомные и бессимптомные варианты, когда не наблюдается воспалительный процесс. Особенно это касается урогенитального хламидиоза (УГХ): метод выделения этого возбудителя на культуре клеток, бывший до недавнего времени «золотым стандартом» диагностики УГХ, как уже упоминалось, имеет чувствительность 60-90% и уступает ПЦР по этому показателю. А в целом, цифры таковы: хламидиоз бессимптомно протекает почти у 80% зараженных этим возбудителем мужчин и у 50% женщин; присутствие трихомониаза не ощущают большинство мужчин и более 10% женщин, гонорея бессимптомно протекает у 10% мужчин и более 50% женщин.
Могут встретиться и новые изоляты ИППП, которые ранее не встречались, то есть патогены с мутациями и тогда есть вероятность, что метод ПЦР не сработает.
А в целом, практически любой положительный и, подчеркиваю, отрицательный результат, полученный при диагностике ИППП каким-то одним методом, необходимо проверять другим методом или методами. Выбор же методов диагностики зависит от возможностей лаборатории и квалификации специалистов.
ЗППП (ИППП, урогенитальные инфекции)
Существуют более 30 различных микроорганизмов (бактерий и вирусов), вызывающих урогенитальные инфекции и передающихся половым путем. Основные наиболее распространенные ИППП:
Также распространен термин «венерические заболевания», так как передача инфекций происходит в основном при незащищенных половых контактах, в том числе при вагинальном, анальном и оральном. Некоторые инфекции, например ВИЧ-инфекция и сифилис, могут быть переданы плоду во время беременности или в родах от инфицированной матери. Также возможно заражение через кровь и препараты крови (ВИЧ, вирусные гепатиты). Маленьким детям может передаться инфекция от больных родителей при нарушении гигиены и ухода.
Основная проблема ИППП в том, что большинство случаев протекает бессимптомно или с неярко выраженными клиническими проявлениями. Но даже при таком течении высок риск развития осложнений.
Основные жалобы при вышеуказанныхИППП:
Основные осложнения ИППП.
Нужно помнить, что более половины случаев ИППП протекают без клинических проявлений! Но несмотря на отсутствие жалоб сохраняется высокая вероятность развития осложнений! Поэтому даже бессимптомное течение при лабораторном подтверждении диагноза требует обязательного лечения! Половые партнеры у лиц с установленным ИППП должны быть обследованы!
Кому нужно сдать анализ на ИППП?
Диагностика
Особенностью ИППП является отсутствие какой-либо характерной клинической картины заболевания. При этом каждый возбудитель обладает индивидуальной чувствительностью к антибактериальным препаратам, т.е. лечение каждого из четырех ИППП (гонорея, трихомониаз, хламидиоз и инфекция, вызванная микоплазмой гениталиум) будет отличаться. Часто встречаются смешанные инфекции. Это значит, что одновременно можно заразиться несколькими возбудителями, и лечение должно быть скорректировано в зависимости от выявленного возбудителя ИППП. Поэтому для диагностики ЗППП нужны высокоточные и быстрые тесты!
В лаборатории CMDможно сдать следующие анализы на ИППП:
Так как часто одновременно с ИППП могут встречаться и нарушения микробиоценоза влагалища, кандидоз, рекомендуется сдавать комплексный тест на ИППП и выявления дисбиозов:
При использовании тестов ПЦР и NASBA необходимо руководствоваться следующими рекомендациями
При использовании методаNASBA с определением РНК микроорганизма мазки рекомендуется брать не ранее, чем через 14 дней после окончания приема антибактериальных препаратов, при применении ПЦР – не ранее, чем через месяц. Мазки из уретры необходимо брать не ранее, чем через 3 часа после последнего мочеиспускания, мазки из цервикального канала из влагалища брать вне менструации.
Анализы на ЗППП — виды, особенности проведения, правила подготовки
ЗППП анализы — это отдельный вид лабораторных исследований, направленных на обнаружение инфекционных заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП), в ходе проведения клинической диагностики.
К списку таких заболеваний традиционно относятся: ВИЧ (вирус иммунодефицита человека), генитальный герпес, гонорея, микоплазмоз, папилломавирусная инфекция, сифилис, трихомониаз, уреаплазмоз, хламидиоз, цитомегаловирус.
Показания
Необходимость проведения анализов на ЗППП возникает при наличии обоснованных подозрений заражения (половой контакт с носителем ЗППП), а также возникновении симптомов, которые могут свидетельствовать об инфицировании:
сыпь, зуд или покраснение кожи в генитальной области;
боль и жжение во время мочеиспускания;
примеси крови в моче;
генитальные выделения жёлтого или белого цвета с резким неприятным запахом;
болевой синдром в области половых органов или брюшной полости;
бесплодие или половые дисфункции (как часть комплексной диагностики).
Виды анализов ЗППП
Существует 4 основных анализа на ЗППП: мазок, бакпосев, ИФА, ПЦР. Выбор конкретного типа исследования делает врач, исходя из жалоб пациента и общей клинической картины.
Мазок
Исследуемый материал — верхний слой слизистой оболочки мочеиспускательного канала у мужчин или влагалища и цервикального канала у женщин. Отобранные образцы изучаются под микроскопом, а результат может быть получен в течение 30-60 минут.
Исследование позволяет выявить таких возбудителей ЗППП, как гарднереллы, гонококки, трихомонады, уреаплазмы, хламидии, а также ряд грибковых инфекций.
Недостатки: малоинформативно на начальных стадиях ЗППП.
Бакпосев
Исследуемый материал — кровь, моча, кал, слюна, генитальные выделения. Отобранные образцы помещаются в специальную питательную среду, способствующую активному размножению предполагаемого возбудителя для последующего его изучения. Результат может быть получен через 3-10 дней, в зависимости от особенностей анализа.
Исследование помогает не только установить наличие в организме конкретного возбудителя, но и определить его чувствительность к определённым группам антибиотиков. Бакпосев эффективен для обнаружения гарднерелл, гонококков, кандидоза, микоплазмоза, уреаплазмоза, трихомонад.
Недостатки: применим только к инфекциям, которые можно вырастить в питательных средах.
ИФА (иммуноферментный анализ)
Исследуемый материал — кровь, моча, урогенитальные соскобы. Суть анализа — обнаружение в образцах специальных защитных веществ-антител, которые всегда выделяются организмом в ответ на присутствие патогенного возбудителя. Результат может быть получен в течение суток.
Применяется для обнаружения практически любых возбудителей ЗППП, однако в силу высокой специфичности исследования требует постановки предварительного диагноза, то есть уточнения патогена, который должен выявить анализ.
Недостатки: исследования не всегда информативны на ранних стадиях ЗППП, поскольку на некоторые инфекции организм вырабатывает антитела не сразу.
ПЦР (полимеразная цепная реакция)
Исследуемый материал — кровь, моча, урогенитальные соскобы или выделения. Суть метода — выявление фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в исследуемом образце. Результат может быть получен через 3-4 часа.
Позволяет с абсолютной точностью обнаружить присутствие в организме любого возбудителя ЗППП, вне зависимости от стадии заболевания.
Недостатки: провести такой анализ можно не в каждой лаборатории.
Как подготовиться к сдаче анализов
Правила подготовки к сдаче анализов на ЗППП зависят от вида предстоящего исследования.
Общие рекомендации. Кровь и моча всегда сдаются утром натощак или минимум через 8 часов после употребления пищи. Приём лекарственных препаратов в период проведения анализов ЗППП — только по согласованию с врачом.
Мазок, посев. За 1-2 дня до сдачи образцов отказаться от половых контактов и гигиенических процедур с применением мыла или средств интимной гигиены (включая спринцевание у женщин).
ИФА. За 24 часа до сдачи материала отказаться от спиртного, а также обильного употребления жирной пищи. За час до сдачи образцов — воздержаться от курения.
ПЦР. При сдаче урогенитальных жидкостей (сперма, секрет предстательной железы и пр.) рекомендуется половое воздержание в течение 2-3 суток. Образцы слюны сдаются утром натощак, до выполнения любых гигиенических процедур по санации полости рта.
Интерпретация результатов
Правильно интерпретировать результаты анализов может только лечащий врач, с учётом истории болезни пациента, а также наличия у него других заболеваний. Самостоятельное трактование исследований на ЗППП по «советам из интернета» чревато неточностями и неверным пониманием фактического состояния больного.
ПЦР-диагностика для выявления инфекции
Если судить по сюжетам многочисленных голливудских блокбастеров, то все, чего достигают генетики — успешное создание монстров-мутантов, угрожающих человечеству. На самом же деле современная генетика — наука, которая открывает новые горизонты для медицины. Одним из таких «горизонтов» является полимеразная цепная реакция. Этот метод, созданный исследователями молекулярной биологии, на сегодняшний день широко применяется в медицине, а также в криминалистике. При этом провести его может только специально оснащенный медицинский центр или лаборатория.
При ПЦР биоматериал диагностируется генетически. Этот метод позволяет проводить эффективное обнаружение заболеваний генетического и инфекционного характера. Большим плюсом ПЦР-диагностики является то, что с помощью этого метода можно выявить болезнь еще до того, как она даст о себе знать. Метод ПЦР обладает высокой точностью и способен помочь даже в тех случаях, когда прочие методы не дают результатов.
Какие заболевания возможно выявить ПЦР-диагностикой?
Болезни, которые диагностирует ПЦР, носят, как уже говорилось, инфекционный, а также бактериальный характер. В их числе:
Генетический набор является уникальным у каждого человека. Гены содержит каждая ДНК-молекула. То есть если в организме есть вирус, то его ДНК можно обнаружить. Исследуя биоматериал, ПЦР выявляет возбудителя заболевания. Биоматериал может быть разнообразным — клетка эпителия, моча, кровь, одним словом, все, в чем содержится ДНК.
Метод успешно применим в определении отцовства. Однако нужно помнить, что у однояйцевых близнецов ДНК почти одинакова. Следовательно, результаты ПЦР у близнецов будут почти совпадать.
ПЦР-диагностика — один из прорывов в науке. Благодаря этому методу миллионы людей вовремя получили медицинскую помощь. А ведь наше здоровье и здоровье наших близких — это самое ценное сокровище.